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JCI:復旦大學袁正宏課題組等揭示乙肝病毒“生活方式”

2016-02-27 來源:健客網(wǎng)社區(qū)  標簽: 掌上醫(yī)生 喝茶減肥 一天瘦一斤 安全減肥 cps聯(lián)盟 美容護膚
摘要:大量臨床與基礎(chǔ)研究表明,慢乙肝長期遷延不愈的根本原因在于乙肝病毒共價閉合環(huán)狀DNA (cccDNA)在肝內(nèi)的長期存在以及隨之造成的病毒表面抗原血癥。

  2月22日,國際學術(shù)期刊《Journal of Clinical Investigation》雜志在線發(fā)表了復旦大學上海醫(yī)學院醫(yī)學分子病毒學重點實驗室袁正宏課題組與復旦大學附屬公共衛(wèi)生臨床中心科學研究部慢性乙型肝炎研究組、肝炎科、病理科共同合作的題為“In situ analysis of intrahepatic virological events in chronic hepatitis B virus infection”(《慢性乙型肝炎病毒患者肝內(nèi)病毒學事件的原位分析》的研究論文,研究揭示了乙肝病毒在患者體內(nèi)不為人知的“生活方式”。張小楠、陸偉為論文共同第一作者,袁正宏研究員與張占卿研究員為論文共同通訊作者。

  《Journal of Clinical Investigation》雜志今年3月刊將正式報道上述研究結(jié)果,并作為“亮點論文”進行重點推薦,邀請了國際著名乙肝專家、澳大利亞維多利亞傳染病參比實驗室研究部主任Stephen Locarnini和Peter Revill教授作專題評論。

  乙型肝炎病毒是一種嚴重影響人類健康的病原體,也是引發(fā)慢性乙型肝炎(慢乙肝)的元兇。根據(jù)國際衛(wèi)生組織2015年最新估計,全球約有2.4億慢乙肝患者,大多分布在低收入及中等收入國家,每年約有65萬患者死于慢乙肝感染所致的肝衰竭、肝硬化和肝細胞癌。

  在我國,現(xiàn)有9300萬慢乙肝感染者,在肝硬化和肝細胞癌患者中,由乙肝病毒引發(fā)的比例分別高達60%和80%。隨著我國乙肝疫苗接種的推行,我國嬰幼兒的乙肝陽性率有了大幅度的降低。然而,對于其他已經(jīng)感染病毒者,仍缺乏徹底治愈的療法,從而給大量家庭帶來了沉重的經(jīng)濟負擔和健康威脅。大量臨床與基礎(chǔ)研究表明,慢乙肝長期遷延不愈的根本原因在于乙肝病毒共價閉合環(huán)狀DNA (cccDNA)在肝內(nèi)的長期存在以及隨之造成的病毒表面抗原血癥。由于cccDNA在慢乙肝患者肝臟中的水平極低,傳統(tǒng)分子生物學方法(如Southern印記、cccDNA特異性聚合酶鏈反應(yīng))不僅檢測困難,而且無法顯示其組織內(nèi)分布特點。

  鑒于目前乙肝cccDNA研究存在的問題,在袁正宏研究員指導下,公衛(wèi)中心科學研究部張小楠博士在bDNA信號擴增技術(shù)基礎(chǔ)上進行二次開發(fā),成功建立了一種能夠在組織水平顯示cccDNA分布的原位雜交技術(shù)。該技術(shù)還能顯示乙肝病毒的其他復制中間體,如前基因組RNA (pgRNA)、松弛環(huán)狀DNA(rcDNA)在單細胞水平分布情況。研究組將該原位雜交與乙肝病毒主要抗原的免疫組織化學染色結(jié)合,獲得了病毒核酸與蛋白質(zhì)的綜合圖像。

  令人意外的是,乙肝病毒抗原與核酸在單細胞水平呈現(xiàn)驚人的“馬賽克狀”分布,即病毒的ccc DNA、RNA與表面抗原均顯示極為顯著的負相關(guān)關(guān)系。研究進一步證實,經(jīng)過一年以上抗病毒治療的患者肝細胞內(nèi)仍存在乙肝病毒的ccc DNA。綜合前人研究發(fā)現(xiàn)和本課題基于大量患者樣本的觀察結(jié)果,研究組提出在單細胞水平乙肝病毒存在“抗原富集期”、“DNA富集期”和“潛伏期”的“三階段”假說,推測患者體內(nèi)肝細胞生理水平和病毒復制活躍度的變化可以導致這三個階段的相互轉(zhuǎn)換。

  該假說在單細胞水平描述了病毒生活周期的復雜變化模式,豐富了學術(shù)界對乙肝病毒肝內(nèi)生活史的認識,為進一步針對患者不同病情設(shè)計清除乙肝病毒ccc DNA的新策略提供了理論基礎(chǔ)。

  據(jù)袁正宏研究員介紹,該研究建立的乙肝病毒cccDNA原位雜交技術(shù)不僅對深化重要的基礎(chǔ)研究具有較大價值,同時也具有廣闊的應(yīng)用前景。該方法可以用來監(jiān)測慢乙肝患者抗病毒治療后cccDNA的清除情況,從而為評價抗病毒藥物清除病毒的潛力提供了重要的技術(shù)平臺。目前,研究組正著手該方法的進一步開發(fā),將其作為乙肝病毒分子病理檢測方法進行推廣應(yīng)用,為臨床醫(yī)師綜合評價患者肝內(nèi)病毒學狀態(tài)提供參考。

 

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