目的 研究軟骨細(xì)胞骨架蛋白結(jié)構(gòu)改變與成軟骨細(xì)胞表型改變的關(guān)系，初步闡述軟骨細(xì)胞骨架變化在骨關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)制中的作用。

　　方法 采用三維微團(tuán)培養(yǎng)（pellet culture）法培養(yǎng)新西蘭兔膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞，2周后加用秋水仙堿、細(xì)胞松弛素 B 及丙烯酰胺分別作用于軟骨細(xì)胞骨架的微管、肌動(dòng)蛋白微絲及波形蛋白中間纖絲，繼續(xù)培養(yǎng) 1 周、3 周后分別從大體形態(tài)、組織切片染色、免疫組化染色及 PCR 技術(shù)分析對(duì)照組、秋水仙堿組、細(xì)胞松弛素 B組及丙烯酰胺組成軟骨細(xì)胞表型的改變。

　　結(jié)果 pellet culture 法培養(yǎng)軟骨細(xì)胞，2 周后可形成肉眼明顯可見的細(xì)胞微團(tuán)組織；加用秋水仙堿、細(xì)胞松弛素 B 及丙烯酰胺處理 1 周時(shí)各組形成細(xì)胞微團(tuán)大小無明顯差別，3 周時(shí)對(duì)照組大小較其它各組明顯；HE 染色顯示 1 周時(shí)對(duì)照組細(xì)胞多邊形，核仁明顯，細(xì)胞分布均勻、密集，秋水仙堿組及細(xì)胞松弛素 B 組和對(duì)照組相比無明顯差異，而丙烯酰胺組細(xì)胞較少，分散；3 周時(shí)對(duì)照組細(xì)胞圓形，形成類軟骨陷窩結(jié)構(gòu)，秋水仙堿組、細(xì)胞松弛素 B 組及丙烯酰胺組細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則；阿爾新藍(lán)染色顯示 1 周時(shí)對(duì)照組軟骨細(xì)胞周圍深染，基質(zhì)染色稍淺，秋水仙堿組及細(xì)胞松弛素 B 組和對(duì)照組相比無明顯差異，而丙烯酰胺組軟骨細(xì)胞周圍及基質(zhì)染色均較淺，3 周時(shí)四組染色無明顯區(qū)別；免疫組化染色顯示 1 周、3 周時(shí)對(duì)照組 COLⅡ深染，COLⅠ淡染，秋水仙堿組及細(xì)胞松弛素 B 組和對(duì)照組相比無明顯差異，而 1 周時(shí)丙烯酰胺組 COLⅡ及 COLⅠ染色相差不大，3 周時(shí) COLⅠ染色較深；PCR 檢測(cè)顯示 1 周、3 周時(shí)對(duì)照組、秋水仙堿組、細(xì)胞松弛素 B 組及丙烯酰胺組 COLⅡ、Aggrecan 表達(dá)呈下降趨勢(shì)，而 COLⅠ表達(dá)呈上升趨勢(shì)，對(duì)照組和秋水仙堿組、細(xì)胞松弛素 B 組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，對(duì)照組和丙烯酰胺組相比，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

　　結(jié)論 調(diào)節(jié)細(xì)胞微團(tuán)中軟骨細(xì)胞波形蛋白中間纖絲，可使軟骨細(xì)胞 COLⅡ、Aggrecan 下降，COLⅠ表達(dá)上調(diào)。