石榴提取物可抑制軟骨退變及PGE2和MMP的表達(dá)

2017-05-13 來源：關(guān)節(jié)時間標(biāo)簽：掌上醫(yī)生喝茶減肥一天瘦一斤安全減肥 cps聯(lián)盟美容護(hù)膚

摘要：實驗采用成年新西蘭白兔，采用前交叉韌帶切斷術(shù)誘導(dǎo)形成脛股骨關(guān)節(jié)炎。實驗組之一在術(shù)后的飲水中加入PFE，持續(xù)8周，另一實驗組則分別在術(shù)前2周和術(shù)后8周加入PFE，對照組的飲水中不加PFE。

　　目的

　　骨關(guān)節(jié)炎的特點為受累關(guān)節(jié)的軟骨退變。而體外實驗表明，石榴提取物（PFE）可抑制軟骨退變。本研究旨在評價手術(shù)誘導(dǎo)的白兔骨關(guān)節(jié)炎模型口服PFE能否阻止骨關(guān)節(jié)炎疾病進(jìn)展。

　　方法

　　實驗采用成年新西蘭白兔，采用前交叉韌帶切斷術(shù)誘導(dǎo)形成脛股骨關(guān)節(jié)炎。實驗組之一在術(shù)后的飲水中加入PFE，持續(xù)8周，另一實驗組則分別在術(shù)前2周和術(shù)后8周加入PFE，對照組的飲水中不加PFE。

　　根據(jù)國際骨關(guān)節(jié)炎研究學(xué)會指南進(jìn)行組織學(xué)分析和軟骨評分。采用定量逆轉(zhuǎn)錄酶聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和熒光檢測確定基因表達(dá)和基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）活性。使用酶聯(lián)免疫吸附試驗對滑液、血漿、培養(yǎng)基中的白介素（IL）-1β，MMP-13，IL-6，前列腺素（PG）E2以及II型膠原蛋白（COL2A1）水平進(jìn)行定量。采用免疫組化分析確定活性caspase-3和多腺苷二磷酸多聚酶p85的表達(dá)。分析PFE和MMP-13、絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）以及核因子（NF）-κB抑制劑對白兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的影響。

　　結(jié)果

　　術(shù)后飲水加入PFE的實驗組中，番紅O染色和軟骨細(xì)胞群形成顯著減少。MMP-3、MMP-9和MMP-13 mRNA的表達(dá)在對照組白兔軟骨中較高，但在加入PFE的白兔中顯著降低。加入PFE的白兔的滑液與血漿中的IL-6、MMP-3和PGE2水平較低，而蛋白多糖和COL2A1 mRNA的表達(dá)較高。對照組的白兔關(guān)節(jié)中，凋亡標(biāo)志物水平顯著高于實驗組。PFE預(yù)處理可顯著降低白兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞中IL-1β誘導(dǎo)的IL-6和MMP表達(dá)。采用MMP-13、MAPK和NK-κB抑制劑處理IL-1β刺激的白兔軟骨細(xì)胞時也可觀察到類似的作用。在一項體外活性實驗中可觀察到PFE可阻斷MMP-13的活性。與MAPK和NF-κB抑制劑相似，PFE也可有效抑制IL-1β誘導(dǎo)白兔軟骨細(xì)胞生成PGE2。在經(jīng)IL-1β處理的白兔軟骨細(xì)胞中，PFE還可逆轉(zhuǎn)IL-1β對COL2A1 mRNA與蛋白表達(dá)的抑制作用。

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