梅毒螺旋體侵入機(jī)體可產(chǎn)生非特異的反應(yīng)素和抗密螺旋體抗體等兩種抗體，因而免疫測(cè)定方法可根據(jù)所使用的抗原分為非密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)和密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)兩大類。

　　1、梅毒螺旋體感染的檢測(cè)方法

　　1.1概述

　　由于梅毒螺旋體侵入機(jī)體可產(chǎn)生非特異的反應(yīng)素和抗密螺旋體抗體等兩種抗體，因而免疫測(cè)定方法可根據(jù)所使用的抗原分為非密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)和密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)兩大類，前者以心磷脂為抗原檢測(cè)血清中抗心磷脂抗體，也就是所謂的反應(yīng)素；后者則是以密螺旋體或其成分為抗原檢測(cè)血清中特異的抗密螺旋體抗體。

　　1.2非密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)

　　非密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)基本原理就是采用從牛心中提取的心磷脂作為抗原，梅毒螺旋體在破壞機(jī)體組織的過(guò)程中，體內(nèi)釋放一種心磷脂抗原，這種抗原可刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體即反應(yīng)素，其與牛心中提取的心磷脂在體外可產(chǎn)生免疫結(jié)合反應(yīng)。此類試驗(yàn)主要包括VDRL（venerealdiseaseresearchlaboratorytest）、RPR（rapidplasmaregaincirclecardtest）和甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST）等。

　　非密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)操作簡(jiǎn)便快速，但是由于其所用的抗原是類脂質(zhì)抗原，而不是密螺旋體抗原，因此特異性較差，可在多種疾病中出現(xiàn)假陽(yáng)性的結(jié)果，例如麻風(fēng)、結(jié)核、紅斑狼瘡、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、猩紅熱等，據(jù)報(bào)道上述實(shí)驗(yàn)在沒(méi)有梅毒感染史的正常人群中陽(yáng)性率達(dá)0.1%。此外，由于感染梅毒螺旋體后，機(jī)體血循環(huán)中心磷脂抗體的出現(xiàn)要晚于特異性的抗梅毒螺旋體抗體，并且三期梅毒這類抗體還有可能轉(zhuǎn)陰。

　　基于以上原因，通常不推薦采用非密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)作為梅毒的篩查試驗(yàn)，可用于梅毒疾病活動(dòng)性的判定、療效檢測(cè)等。

　　1.3密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)

　　密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)又稱為梅毒特異性抗體檢測(cè)試驗(yàn)。目前較為常用的有：熒光密螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（fluoresenttreponemalantibody-absorptiontest，F(xiàn)TA-ABS）、梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)（treponemapallidumhemagglutinationassay，TPHA）、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)（treponemapallidumparticleagglutinationassay，TPPA）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、化學(xué)發(fā)光免疫分析（CLIA）和蛋白印跡技術(shù)（Westernblotting，WB）。這些血清學(xué)試驗(yàn)大部分采用重組抗原，并檢測(cè)總的抗密螺旋體抗體（IgG和IgM）。通常采用密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（如TPPA、TPHA、ELISA、CLIA等）作為篩查試驗(yàn)。

　　1.4特異性梅毒螺旋體IgM血清學(xué)試驗(yàn)

　　包括19S-IgM-FTA-ABS、梅毒螺旋體IgM免疫印跡和特異性抗梅毒螺旋體IgMELISA等。

　　2、梅毒螺旋體感染的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)程序

　　2.1篩查試驗(yàn)

　　a）采用密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)，如ELISA和TPPA/TPHA（TPPA優(yōu)于TPHA）作為篩查試驗(yàn)；

　　b）如懷疑一期梅毒，可進(jìn)行特異性梅毒螺旋體IgM血清學(xué)試驗(yàn)，如有必要，可在1-2周后重復(fù)檢測(cè)；

　　c）在特殊情況下，可以采用快速密螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)，但是陽(yáng)性結(jié)果必須經(jīng)過(guò)血清學(xué)確認(rèn)試驗(yàn)驗(yàn)證；

　　d）不推薦RPR/VDRL/TRUST作為血清學(xué)篩查試驗(yàn)。但是，RPR/VDRL可用于對(duì)有臨床癥狀的高風(fēng)險(xiǎn)患者進(jìn)行早期梅毒的快速檢測(cè)，同時(shí)采用密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（ELISA或TPPA）作為補(bǔ)充試驗(yàn)。此時(shí)進(jìn)行RPR/VDRL/TRUST檢測(cè)時(shí)，需對(duì)血清樣本進(jìn)行原倍以及稀釋檢測(cè)，以避免前帶現(xiàn)象導(dǎo)致的假陰性結(jié)果。

　　2.2篩查試驗(yàn)陽(yáng)性結(jié)果的確認(rèn)

　　a）推薦采用與篩查試驗(yàn)中不同的密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)進(jìn)行確認(rèn)：如果采用ELISA進(jìn)行篩查，則采用TPPA或TPHA進(jìn)行陽(yáng)性結(jié)果的確認(rèn)；如果采用TPPA或TPHA進(jìn)行篩查，則采用ELISA進(jìn)行陽(yáng)性結(jié)果的確認(rèn)。如果確認(rèn)結(jié)果為陽(yáng)性，可采用TPPA或TPHA進(jìn)行定量。

　　b）當(dāng)TPPA/TPHA與ELISA結(jié)果不符時(shí)，IgG蛋白印跡可以為作補(bǔ)充性的確認(rèn)試驗(yàn)。

　　c）通常不推薦采用FTA-ABS作為確認(rèn)試驗(yàn)。但是，如果在非常專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，確認(rèn)試驗(yàn)的檢測(cè)量非常大，并且可以保證試劑的檢測(cè)質(zhì)量以及良好的重復(fù)性，也可以采用FTA-ABS。

　　d）如有必要，可以陽(yáng)性結(jié)果的患者重新采樣，并且再次檢測(cè)以驗(yàn)證檢測(cè)結(jié)果。

　　2.3檢測(cè)梅毒的血清學(xué)活動(dòng)性

　　當(dāng)確認(rèn)試驗(yàn)的結(jié)果為陽(yáng)性時(shí)，應(yīng)采用RPR/VDRL進(jìn)行血清學(xué)的定量檢測(cè)來(lái)判定疾病的活動(dòng)性。如已經(jīng)過(guò)有效的治療，則RPR/VDRL檢測(cè)的抗體滴度通常<32；如抗體滴度<32或?yàn)殛幮越Y(jié)果，也不能排除活動(dòng)性感染，盡管這種情況非常少見(jiàn)。

　　如果確認(rèn)試驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性且有臨床癥狀的PRP/VDRL陰性的患者，應(yīng)進(jìn)行特異性的密螺旋體IgM檢測(cè)，如密螺旋體IgM陽(yáng)性，則提示活動(dòng)性感染；密螺旋體IgM陰性不能排除活動(dòng)性感染，特別是患者處于梅毒感染的晚期時(shí)。

　　3、梅毒螺旋體抗體檢測(cè)的結(jié)果報(bào)告和解釋

　　3.1梅毒螺旋體抗體檢測(cè)陰性

　　梅毒螺旋體抗體檢測(cè)陰性表示未感染梅毒螺旋體，但也可能存在以下情況：

　　――梅毒螺旋體感染的窗口期（大約２-４周）；

　　――RPR/VDRL檢測(cè)陰性可以在二期梅毒、潛伏期出現(xiàn)，在神經(jīng)梅毒早期如果使用未稀釋的樣本檢測(cè)也可能出現(xiàn)假陰性的結(jié)果；

　　――晚期梅毒由于心磷脂抗體逐漸減少，也可能出現(xiàn)假陰性的結(jié)果；

　　在二期梅毒中，偶有報(bào)道出現(xiàn)一過(guò)性的血清學(xué)陰性結(jié)果。

　　3.2梅毒螺旋體抗體檢測(cè)陽(yáng)性

　　梅毒螺旋體抗體檢測(cè)陽(yáng)性表示梅毒螺旋體抗體陽(yáng)性，但也可能存在以下情況：

　　――在自身免疫病、HIV感染、孕期婦女、靜脈藥癮者中均有可能出現(xiàn)梅毒螺旋體抗體假陽(yáng)性結(jié)果；

　　――FTA-ABS檢測(cè)在自身免疫病患者中更容易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；

　　――生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)，指存在抗心磷脂抗體，但抗心磷脂抗體并非由梅毒螺旋體引起。

　　這種情況通常出現(xiàn)在使用RPR/VDRL檢測(cè)中。生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)分為急性反應(yīng)（持續(xù)時(shí)間<６個(gè)月）和慢性反應(yīng)（持續(xù)時(shí)間>６個(gè)月）。急性生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)可見(jiàn)于孕期婦女、近期進(jìn)行過(guò)免疫接種、近期發(fā)生過(guò)心肌梗塞以及發(fā)熱性感染性疾病。慢性生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)可見(jiàn)于靜脈藥癮者、自身免疫病、麻風(fēng)、慢性肝病（慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎等）以及老年人。

　　——如果缺乏梅毒的感染史或密螺旋體IgM陽(yáng)性的結(jié)果，在單個(gè)密螺旋體抗體血清學(xué)試驗(yàn)（其它試驗(yàn)均為陰性）中出現(xiàn)的持續(xù)或者暫時(shí)的陽(yáng)性結(jié)果可認(rèn)為是假陽(yáng)性結(jié)果。