1、梅毒螺旋體感染的檢測方法

　　1.1概述

　　由于梅毒螺旋體侵入機(jī)體可產(chǎn)生非特異的反應(yīng)素和抗密螺旋體抗體等兩種抗體，因而免疫測定方法可根據(jù)所使用的抗原分為非密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)和密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)兩大類，前者以心磷脂為抗原檢測血清中抗心磷脂抗體，也就是所謂的反應(yīng)素；后者則是以密螺旋體或其成分為抗原檢測血清中特異的抗密螺旋體抗體。

　　1.2非密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)

　　非密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)基本原理就是采用從牛心中提取的心磷脂作為抗原，梅毒螺旋體在破壞機(jī)體組織的過程中，體內(nèi)釋放一種心磷脂抗原，這種抗原可刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體即反應(yīng)素，其與牛心中提取的心磷脂在體外可產(chǎn)生免疫結(jié)合反應(yīng)。此類試驗(yàn)主要包括VDRL(venerealdiseaseresearchlaboratorytest)、RPR(rapidplasmaregaincirclecardtest)和甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST）等。

　　非密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)操作簡便快速，但是由于其所用的抗原是類脂質(zhì)抗原，而不是密螺旋體抗原，因此特異性較差，可在多種疾病中出現(xiàn)假陽性的結(jié)果，例如麻風(fēng)、結(jié)核、紅斑狼瘡、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、猩紅熱等，據(jù)報(bào)道上述實(shí)驗(yàn)在沒有梅毒感染史的正常人群中陽性率達(dá)0.1%。此外，由于感染梅毒螺旋體后，機(jī)體血循環(huán)中心磷脂抗體的出現(xiàn)要晚于特異性的抗梅毒螺旋體抗體，并且三期梅毒這類抗體還有可能轉(zhuǎn)陰。

　　基于以上原因，通常不推薦采用非密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)作為梅毒的篩查試驗(yàn)，可用于梅毒疾病活動(dòng)性的判定、療效檢測等。

　　1.3密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)

　　密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)又稱為梅毒特異性抗體檢測試驗(yàn)。目前較為常用的有：熒光密螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（fluoresenttreponemalantibody-absorptiontest,FTA-ABS）、梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)（treponemapallidumhemagglutinationassay,TPHA）、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)（treponemapallidumparticleagglutinationassay,TPPA）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、化學(xué)發(fā)光免疫分析（CLIA）和蛋白印跡技術(shù)（Westernblotting,WB）。這些血清學(xué)試驗(yàn)大部分采用重組抗原，并檢測總的抗密螺旋體抗體（IgG和IgM）。通常采用密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（如TPPA、TPHA、ELISA、CLIA等）作為篩查試驗(yàn)。

　　1.4特異性梅毒螺旋體IgM血清學(xué)試驗(yàn)

　　包括19S-IgM-FTA-ABS、梅毒螺旋體IgM免疫印跡和特異性抗梅毒螺旋體IgMELISA等。

　　2、梅毒螺旋體感染的實(shí)驗(yàn)室檢測程序

　　2.1篩查試驗(yàn)

　　a)采用密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)，如ELISA和TPPA/TPHA(TPPA優(yōu)于TPHA)作為篩查試驗(yàn)；

　　b)如懷疑一期梅毒，可進(jìn)行特異性梅毒螺旋體IgM血清學(xué)試驗(yàn)，如有必要，可在1-2周后重復(fù)檢測；

　　c)在特殊情況下，可以采用快速密螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)，但是陽性結(jié)果必須經(jīng)過血清學(xué)確認(rèn)試驗(yàn)驗(yàn)證；

　　d)不推薦RPR/VDRL/TRUST作為血清學(xué)篩查試驗(yàn)。但是，RPR/VDRL可用于對有臨床癥狀的高風(fēng)險(xiǎn)患者進(jìn)行早期梅毒的快速檢測，同時(shí)采用密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（ELISA或TPPA）作為補(bǔ)充試驗(yàn)。此時(shí)進(jìn)行RPR/VDRL/TRUST檢測時(shí)，需對血清樣本進(jìn)行原倍以及稀釋檢測，以避免前帶現(xiàn)象導(dǎo)致的假陰性結(jié)果。

　　2.2篩查試驗(yàn)陽性結(jié)果的確認(rèn)

　　a)推薦采用與篩查試驗(yàn)中不同的密螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)進(jìn)行確認(rèn)：如果采用ELISA進(jìn)行篩查，則采用TPPA或TPHA進(jìn)行陽性結(jié)果的確認(rèn)；如果采用TPPA或TPHA進(jìn)行篩查，則采用ELISA進(jìn)行陽性結(jié)果的確認(rèn)。如果確認(rèn)結(jié)果為陽性，可采用TPPA或TPHA進(jìn)行定量。

　　b)當(dāng)TPPA/TPHA與ELISA結(jié)果不符時(shí)，IgG蛋白印跡可以為作補(bǔ)充性的確認(rèn)試驗(yàn)。

　　c)通常不推薦采用FTA-ABS作為確認(rèn)試驗(yàn)。但是，如果在非常專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，確認(rèn)試驗(yàn)的檢測量非常大，并且可以保證試劑的檢測質(zhì)量以及良好的重復(fù)性，也可以采用FTA-ABS。

　　d)如有必要，可以陽性結(jié)果的患者重新采樣，并且再次檢測以驗(yàn)證檢測結(jié)果。

　　2.3檢測梅毒的血清學(xué)活動(dòng)性

　　當(dāng)確認(rèn)試驗(yàn)的結(jié)果為陽性時(shí)，應(yīng)采用RPR/VDRL進(jìn)行血清學(xué)的定量檢測來判定疾病的活動(dòng)性。如已經(jīng)過有效的治療，則RPR/VDRL檢測的抗體滴度通常<32；如抗體滴度<32或?yàn)殛幮越Y(jié)果，也不能排除活動(dòng)性感染，盡管這種情況非常少見。

　　如果確認(rèn)試驗(yàn)結(jié)果為陽性且有臨床癥狀的PRP/VDRL陰性的患者，應(yīng)進(jìn)行特異性的密螺旋體IgM檢測，如密螺旋體IgM陽性，則提示活動(dòng)性感染；密螺旋體IgM陰性不能排除活動(dòng)性感染，特別是患者處于梅毒感染的晚期時(shí)。

　　3、梅毒螺旋體抗體檢測的結(jié)果報(bào)告和解釋

　　3.1梅毒螺旋體抗體檢測陰性

　　梅毒螺旋體抗體檢測陰性表示未感染梅毒螺旋體，但也可能存在以下情況：

　　――梅毒螺旋體感染的窗口期（大約２-４周）；

　　――RPR/VDRL檢測陰性可以在二期梅毒、潛伏期出現(xiàn)，在神經(jīng)梅毒早期如果使用未稀釋的樣本檢測也可能出現(xiàn)假陰性的結(jié)果；

　　――晚期梅毒由于心磷脂抗體逐漸減少，也可能出現(xiàn)假陰性的結(jié)果；

　　在二期梅毒中，偶有報(bào)道出現(xiàn)一過性的血清學(xué)陰性結(jié)果。

　　3.2梅毒螺旋體抗體檢測陽性

　　梅毒螺旋體抗體檢測陽性表示梅毒螺旋體抗體陽性，但也可能存在以下情況：

　　――在自身免疫病、HIV感染、孕期婦女、靜脈藥癮者中均有可能出現(xiàn)梅毒螺旋體抗體假陽性結(jié)果；

　　――FTA-ABS檢測在自身免疫病患者中更容易出現(xiàn)假陽性結(jié)果；

　　――生物學(xué)假陽性反應(yīng)，指存在抗心磷脂抗體，但抗心磷脂抗體并非由梅毒螺旋體引起。

　　這種情況通常出現(xiàn)在使用RPR/VDRL檢測中。生物學(xué)假陽性反應(yīng)分為急性反應(yīng)（持續(xù)時(shí)間<６個(gè)月）和慢性反應(yīng)（持續(xù)時(shí)間>６個(gè)月）。急性生物學(xué)假陽性反應(yīng)可見于孕期婦女、近期進(jìn)行過免疫接種、近期發(fā)生過心肌梗塞以及發(fā)熱性感染性疾病。慢性生物學(xué)假陽性反應(yīng)可見于靜脈藥癮者、自身免疫病、麻風(fēng)、慢性肝病（慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎等）以及老年人。

　?。绻狈γ范镜母腥臼坊蛎苈菪wIgM陽性的結(jié)果，在單個(gè)密螺旋體抗體血清學(xué)試驗(yàn)（其它試驗(yàn)均為陰性）中出現(xiàn)的持續(xù)或者暫時(shí)的陽性結(jié)果可認(rèn)為是假陽性結(jié)果。